期刊简介
1987年10月创刊，中国科学技术协会主管，中华医学会主办。本刊是医学病毒学专业学术期刊，报道医学病毒学的应用及基础理论研究，人类病毒性疾病预防。栏目：述评、人物述林、病毒学、医学微生物学、传染病学、流行病学、儿科学、免疫学、肿瘤学、分子生物学临床免疫、病毒检测、医药信息等。读者为本专业科研人员、老年医学等学科的科技工作者，从事医学病毒学研究的科研人员；高、中等医药院校的有关教学人员；病毒性传染病的临床医师；生物制品工作者；各级卫生防疫工作者；临床检验工作者，以及与人畜共患病毒性疾病防治有关的基层工作者。 80页，单价16元。统一刊号CN11-2866/R,邮发代号18-224。
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首页>中华实验和临床病毒学杂志
- 杂志名称：中华实验和临床病毒学杂志
- 主管单位：实验和临床病毒学杂志
- 主办单位：中国科学技术协会
- 国际刊号：11-2866/R
- 国内刊号：11-2866/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国科协优秀科技期刊二等奖期刊收录：统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 万方收录(中), 文摘与引文数据库, 知网收录(中), 剑桥科学文摘, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
易错PCR提高人源抗狂犬病毒单链抗体的亲和力
孙丽娜；李川；刘洋；李德新；梁米芳
关键词：狂犬病毒, 单链抗体, 亲和力
摘要：目的 通过易错PCR技术提高1株人源抗狂犬病毒单链抗体RV08的亲和力.方法 采用Agilent公司GeneMorph Ⅱ Random Mutagenesis Kit对RV08轻、重链可变区进行易错PCR扩增,随机引入突变,通过单链抗体(Single-chain antibody fragment ScFv)噬菌体呈现技术构建随机突变抗体文库,经狂犬病毒颗粒aG株固相富集筛选,通过ELISA和IFA鉴定阳性抗体克隆并进行序列测定.利用IgG表达载体VH/VK双质粒系统瞬时转染293T细胞实现IgG抗体的分泌型表达,通过非竞争ELISA测定突变抗体亲和力.结果 RV08随机突变抗体库的库容为6×106 cfu/ml,目的基因插入率为100％.重链序列突变频率约为0.95％,轻链序列突变频率约为1.2％,后获得5株高亲和力的抗体突变株,其中3株抗体HL46、HL2和HL37亲和力分别为原始克隆RV08的1.79倍、1.47倍和1.23倍.结论 易错PCR技术与噬菌体抗体库技术相结合使得抗体亲和力获得明显提高,为抗体的体外亲和力成熟提供了参考方法.
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