期刊简介

1987年10月创刊,中国科学技术协会主管,中华医学会主办。本刊是医学病毒学专业学术期刊,报道医学病毒学的应用及基础理论研究,人类病毒性疾病预防。栏目:述评、人物述林、病毒学、医学微生物学、传染病学、流行病学、儿科学、免疫学、肿瘤学、分子生物学临床免疫、病毒检测、医药信息等。读者为本专业科研人员、老年医学等学科的科技工作者,从事医学病毒学研究的科研人员;高、中等医药院校的有关教学人员;病毒性传染病的临床医师;生物制品工作者;各级卫生防疫工作者;临床检验工作者,以及与人畜共患病毒性疾病防治有关的基层工作者。 80页,单价16元。统一刊号CN11-2866/R,邮发代号18-224。

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  • 杂志名称:中华实验和临床病毒学杂志
  • 主管单位:实验和临床病毒学杂志
  • 主办单位:中国科学技术协会
  • 国际刊号:11-2866/R
  • 国内刊号:11-2866/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国科协优秀科技期刊二等奖期刊收录:统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 万方收录(中), 文摘与引文数据库, 知网收录(中), 剑桥科学文摘, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
中华实验和临床病毒学杂志2016年第04期

EV71检测细胞系的构建与鉴定

闫江泓;吕新军;陶晓燕;于鹏程;吴未辰;李淑英;朱武洋

关键词:肠道病毒属, 工程细胞系
摘要:目的 构建71型肠道病毒(enterovirus 71,EV71)检测细胞系.方法 以含有绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的EV71感染性克隆pWSK-T7-EV71-GFP为分子基础,构建GFP基因嵌入病毒基因组两端非编码区的表达盒UGFP,并将其克隆入质粒pLV-Puro获得慢病毒表达载体pLV-UGFP.将质粒pLV-UGFP和包装质粒Helper用脂质体转染法共转染入HEK293T细胞中,转染48 h后,用收集到的慢病毒颗粒感染BHK-21细胞,经嘌呤霉素压力筛选和系列稀释法获得用于外源EV71检测的工程细胞系BHK/UGFP.结果 BHK/UGFP细胞感染EV71 48 h后,可检测到GFP的表达,作为对照组细胞感染甲病毒属的辛德毕斯病毒(XJ-160)和黄病毒属的乙脑病毒(P3)等单股正链RNA病毒,则检测不到绿色荧光.该检测细胞系用不同滴度的EV71感染,至少可以检测到10 PFU/ml的EV71.结论 构建的BHK/UGFP检测细胞系可用于外源EV71的检测,且该检测方法特异性和灵敏性均良好.