期刊简介
1987年10月创刊，中国科学技术协会主管，中华医学会主办。本刊是医学病毒学专业学术期刊，报道医学病毒学的应用及基础理论研究，人类病毒性疾病预防。栏目：述评、人物述林、病毒学、医学微生物学、传染病学、流行病学、儿科学、免疫学、肿瘤学、分子生物学临床免疫、病毒检测、医药信息等。读者为本专业科研人员、老年医学等学科的科技工作者，从事医学病毒学研究的科研人员；高、中等医药院校的有关教学人员；病毒性传染病的临床医师；生物制品工作者；各级卫生防疫工作者；临床检验工作者，以及与人畜共患病毒性疾病防治有关的基层工作者。 80页，单价16元。统一刊号CN11-2866/R,邮发代号18-224。
往期目录
-
2000
-
2001
-
2002
-
2003
-
2004
-
2005
-
2006
-
2007
-
2008
-
2009
-
2010
-
2011
-
2012
-
2013
-
2014
-
2015
-
2016
-
2017
-
2018
首页>中华实验和临床病毒学杂志
- 杂志名称：中华实验和临床病毒学杂志
- 主管单位：实验和临床病毒学杂志
- 主办单位：中国科学技术协会
- 国际刊号：11-2866/R
- 国内刊号：11-2866/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国科协优秀科技期刊二等奖期刊收录：统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 万方收录(中), 文摘与引文数据库, 知网收录(中), 剑桥科学文摘, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
HIV核心抗原p24原核系统的高效表达、纯化及活性鉴定
侯俊；貌盼勇；洪世雯；胡燕；杨健洋；沈宏辉；朱雷
关键词：HIV, 蛋白质p24, 基因表达, 聚合酶链反应
摘要：目的在原核表达系统中对HIV p24抗原基因进行克隆和高效表达、纯化并鉴定其活性.方法利用PCR技术从HIV-1全基因质粒(B2N)中扩增p24抗原基因,并克隆入T载体中.通过酶切消化后连接到表达载体pRSET上,用此连接产物转化大肠埃希菌BL21,经IPTG诱导,表达p24抗原.利用固定化金属离子(Ni2+)配体亲和层析技术从表达蛋白中纯化目的蛋白.并运用双酶切技术、SDS-PAGE电泳、Western Blot(WB)及ELISA法分别对插入基因片段的正确性、表达产物的活性及特异性进行检测.结果PCR产物约为690 bp,与预期p24抗原全基因片段大小一致.重组质粒T-p24和pRSET-p24经BamH I和HindⅢ双酶切,其插入的外源基因片段均为690 bp.将纯化前与纯化后的蛋白作SDS-PAGE电泳,均可见一条约24×103的外源基因表达带,与计算的相对分子质量相符.经WB和ELISA试验,证明基因工程表达的p24抗原具有较高的特异性及活性.结论成功构建了HIV p24表达载体pRSET-p24,并在原核细胞中高效表达,其表达产物具有良好的特异性及活性.
友情链接