期刊简介
1987年10月创刊，中国科学技术协会主管，中华医学会主办。本刊是医学病毒学专业学术期刊，报道医学病毒学的应用及基础理论研究，人类病毒性疾病预防。栏目：述评、人物述林、病毒学、医学微生物学、传染病学、流行病学、儿科学、免疫学、肿瘤学、分子生物学临床免疫、病毒检测、医药信息等。读者为本专业科研人员、老年医学等学科的科技工作者，从事医学病毒学研究的科研人员；高、中等医药院校的有关教学人员；病毒性传染病的临床医师；生物制品工作者；各级卫生防疫工作者；临床检验工作者，以及与人畜共患病毒性疾病防治有关的基层工作者。 80页，单价16元。统一刊号CN11-2866/R,邮发代号18-224。
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首页>中华实验和临床病毒学杂志
- 杂志名称：中华实验和临床病毒学杂志
- 主管单位：实验和临床病毒学杂志
- 主办单位：中国科学技术协会
- 国际刊号：11-2866/R
- 国内刊号：11-2866/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国科协优秀科技期刊二等奖期刊收录：统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 万方收录(中), 文摘与引文数据库, 知网收录(中), 剑桥科学文摘, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
乙型肝炎病毒e抗原基因作为酵母双杂交体系结合域载体的构建及表达
李伯安；戚扬；舒翠利；刘岩；陈昊；李靖；高蓉；侯俊；程云
关键词：肝炎病毒, 乙型, 肝炎E抗原, 酵母菌
摘要：目的以乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)全基因为外源片段,构建酵母双杂交体系中结合域载体,研究其在酵母细胞中的表达,排除自身激活作用及毒性作用,验证其适用性.方法根据报道序列设计、合成HBeAg全基因巢式引物,取患者血清,通过PCR方法分离HBeAg全基因片段,克隆入T载体,酶切鉴定及序列测定后,克隆入酵母双杂交体系结合域载体pGBKT7,构建pGBKT7-eAg载体.再次酶切鉴定阳性克隆后转入酵母,验证毒性作用;通过Western-bolt实验证实外源基因在酵母中的表达;并进一步验证自身激活作用.结果由血清中分离的及2次酶切鉴定的片段大小分别为657 bp和639 bp,与预期大小一致;序列测定与报道的HBV分离株核酸及氨基酸同源性分别为96%和100%;转人酵母后无毒性及自身激活作用;Western-blot实验出现阳性与预期大小(24.3×103)一致的条带.结论pGBKT7-eAg载体在酵母细胞中表达出融合蛋白,进一步验证无自身激活及毒性作用,此载体构建成功,适用于酵母双杂交体系.
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