期刊简介
1987年10月创刊,中国科学技术协会主管,中华医学会主办。本刊是医学病毒学专业学术期刊,报道医学病毒学的应用及基础理论研究,人类病毒性疾病预防。栏目:述评、人物述林、病毒学、医学微生物学、传染病学、流行病学、儿科学、免疫学、肿瘤学、分子生物学临床免疫、病毒检测、医药信息等。读者为本专业科研人员、老年医学等学科的科技工作者,从事医学病毒学研究的科研人员;高、中等医药院校的有关教学人员;病毒性传染病的临床医师;生物制品工作者;各级卫生防疫工作者;临床检验工作者,以及与人畜共患病毒性疾病防治有关的基层工作者。 80页,单价16元。统一刊号CN11-2866/R,邮发代号18-224。
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首页>中华实验和临床病毒学杂志

- 杂志名称:中华实验和临床病毒学杂志
- 主管单位:实验和临床病毒学杂志
- 主办单位:中国科学技术协会
- 国际刊号:11-2866/R
- 国内刊号:11-2866/R
- 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国科协优秀科技期刊二等奖期刊收录:统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 万方收录(中), 文摘与引文数据库, 知网收录(中), 剑桥科学文摘, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
HAV 3a与3d融合蛋白在原核系统中的表达及其抗原活性的研究
程菡茵;周永东;郭瑜;毕胜利
关键词:肝炎病毒, 甲型, 表达, 纯化, 抗原性
摘要:目的研究HAV 3a(位于1 403~1 456aa)与3d(位于1 719~1 764aa)融合蛋白在原核系统中的表达,并探讨该重组蛋白的抗原活性及其应用价值.方法采用常规PCR方法,从克隆有HAV HM175株全长cDNA基因的克隆载体pHAV16H1上扩增出目的基因,以pET-30a作为表达载体,构建重组表达质粒pET-3ad.该重组质粒在大肠埃希菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达.采用镍金属柱螯和亲和层析纯化的方法对重组蛋白进行纯化.以Western blot和间接ELISA的方法检测重组蛋白的抗原活性.结果重组质粒pET-3ad经双酶切(NcoⅠ/Hind Ⅲ)鉴定和序列测定证实构建成功.在大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达有一相对分子质量为18 000的重组蛋白P3ad,该蛋白经亲和层析获得了良好的纯化效果.Western blot结果显示在相对分子质量为18 000处有一特异的免疫印迹条带,表明重组蛋白P3ad具有特异的抗原活性;间接ELISA方法进一步证实了该蛋白的抗原性.结论采用常规的克隆操作方法构建了重组表达质粒pET-3ad,其表达量为20%.表达产物具有良好的抗原性,有望应用于急性HAV感染的诊断和区分活病毒的感染及灭活疫苗的免疫.
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