期刊简介
1987年10月创刊，中国科学技术协会主管，中华医学会主办。本刊是医学病毒学专业学术期刊，报道医学病毒学的应用及基础理论研究，人类病毒性疾病预防。栏目：述评、人物述林、病毒学、医学微生物学、传染病学、流行病学、儿科学、免疫学、肿瘤学、分子生物学临床免疫、病毒检测、医药信息等。读者为本专业科研人员、老年医学等学科的科技工作者，从事医学病毒学研究的科研人员；高、中等医药院校的有关教学人员；病毒性传染病的临床医师；生物制品工作者；各级卫生防疫工作者；临床检验工作者，以及与人畜共患病毒性疾病防治有关的基层工作者。 80页，单价16元。统一刊号CN11-2866/R,邮发代号18-224。
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首页>中华实验和临床病毒学杂志
- 杂志名称：中华实验和临床病毒学杂志
- 主管单位：实验和临床病毒学杂志
- 主办单位：中国科学技术协会
- 国际刊号：11-2866/R
- 国内刊号：11-2866/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国科协优秀科技期刊二等奖期刊收录：统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 万方收录(中), 文摘与引文数据库, 知网收录(中), 剑桥科学文摘, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
HCV E1基因序列的原核高效表达及表达产物的初步应用
高建恩；陶其箴；马大龙；冯百芳；纪和平；季颖
关键词：肝炎病毒, 丙型, 基因表达, 病毒包膜蛋白, 质粒
摘要：目的在原核表达系统中对HCV E1基因进行克隆和高效表达，并初步探讨表达产物在抗-HCV筛选中的作用。方法通过RT-PCR法从HCV RNA阳性的血清标本中扩增出HCV EI片段，并在扩增用的引物中引入克隆所需的酶切位点，克隆产物经Xba I和EeoR I酶切后，在T4DNA连接酶的作用下克降入经同样双酶切的原核表达载体PMS-31b中，并用此连接产物转化大肠埃希菌POP2136，挑取具有氨苄抗性的菌落扩大培养后提取质粒进行酶切鉴定，鉴定出的阳性菌经42℃诱导后用SDS-PAGE检查其表达状况，并用Western blot鉴定表达产物的特异性，同时用初步纯化的表达产物用ELISA法检测病人血清。结果经Sma I酶切后PCR产物被切成144 bp和356 bp的两个片段，在具有氨苄抗性的菌中提取的质粒经Sma I和Xba I酶切后产生了一356 bp的片段；42℃诱导后在SDS-PAGE中出现了一条相对分子质量为31 000的条带，其表达量约为17％，经West-ern blot鉴定后在该处出现了阳性信号；ELISA实验显示在抗HCV阳性的血清中的阳性率约为29.8％(26/90)，而在抗HCV阴性的血清中其阳性率约为3.9％(3/76)。结论通过RT-PCR方法将HCV E1基因从HCV RNA阳性的血清标本中调出，构建了HCV E1的原核表达载体-PMS-E1，其表达量为17％，表达产物具有良好的特异性，有望应用于抗HCV的检测中。
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